自2012年CRISPR基因编辑技术被发明后，基因编辑领域得到了几何级数的发展。新的DNA和RNA编辑技术日新月异，给科研，农业，畜牧业，人类疾病诊断和治疗领域带来了颠覆性的变化，CRISPR的发现也于2020年获得诺贝尔奖。

近十年来，使用此类基因编辑技术的人类体细胞基因治疗产品得到了迅速发展，通过不同的递送工具将不同的基因编辑系统导入特定的靶细胞，改变特定的基因以治病于本。数十项临床试验正在进行，在遗传病（如输血依赖型b-地中海贫血病，镰刀型贫血病，甲状腺素淀粉样变性病等）和癌症（如通用型CAR-T等）等方面展示了显著的初步临床疗效而未发现显著的由基因编辑带来的毒性。

走在最前的CRISPR Therapeutics和Vertex计划今年递交其治疗输血依赖型b-地中海贫血病的基因编辑造血干细胞产品的上市申请。为帮助此类产品从实验室向临床转化和产业化，FDA于2012年3月15日发布了“包含人类基因组编辑的人类基因治疗产品”指南草案，系统化的建议如何评估此类基因组编辑产品的安全性和质量以及解决这些产品潜在风险。

该指导原则共有17页，主要针对基因编辑疗法的CMC、临床前研究、临床研究等问题进行了规范，尤其与基因组编辑方法相关的一些特定风险，包括了脱靶编辑、靶向和脱靶编辑的非预期后果，以及靶向和脱靶编辑未知的长期影响，对于有效且规范研发人类体细胞基因编辑治疗产品具有重要的指导意义。

如何来理解指南的相关内容，同写意邀请了同写意细胞基因治疗俱乐部副理事长，博雅辑因CEO魏东博士做了分析解读。

1、产品开发的一般考虑

选择特定的基因组编辑技术时，应考虑作用机理（MOA）、特异性靶向DNA序列的能力，以及优化基因组编辑组件提高效率、特异性或稳定性的能力。基因组编辑均可能导致非意向的DNA插入或删除，产生意外后果。

建议考虑达到预期治疗效果所需基因组的修饰程度（即治疗修饰阈值）。临床数据可支持给定的治疗修饰阈值。如果没有支持治疗性修饰阈值的临床数据，建议提供达到修饰阈值潜在有效性的理由。

基因组编辑组件的递送方法，须考虑每种方法的优点和局限性（如递送载体可容纳的核酸量、靶向递送效率、基因组编辑组件的持久性和稳定性）。某些基因组编辑组件（如核酸酶）的持久性越长，非意向基因组修饰的风险越高，特别是脱靶编辑和染色体重排。为了限制潜在的脱靶编辑程度，基因组编辑组件的持续时间应尽可能缩短到进行期望基因组修饰所需的时间。

2、CMC建议

建议优化基因组编辑组件，尽可能减少脱靶基因修饰的可能性。可以对编辑器或目标元素进行优化，也可以对基因组编辑组件，如向导RNA，进行优化抑制降解。

通过纳米颗粒以DNA、RNA和/或蛋白质的形式体内给药时，基因组编辑组件被认为是活性药物成分或原料药。直接给予质粒或载体在体内表达基因组编辑组件时，终配方中编码基因组编辑组件的质粒或载体认为是DP。

对于后期研究和上市许可，基因组编辑组件必须按照CGMP标准（21CFR Parts 210 and 211）生产，特别要考虑试剂质量、生产工艺和分析方法的控制。建议对每个基因组编辑组件进行适当检测。除了评估每种组件的无菌、鉴别、纯度和功能性外，视情况还应包括其它检测，如工艺残留检测。建议对基因组编辑组件的稳定性进行评估。所有基因组编辑组件（如冻干和复溶材料，如适用）均应进行稳定性研究。

对DP制造过程和所有过程控制进行详细描述，包括流程图和详细的叙述。提供制造过程中使用的试剂清单和分析证书。对于拟定无菌但不能终端灭菌的DP，应提供确保无菌处理的详细措施。

对DP检测计划分析方法的详细描述，包括检测的准确性、精密度、灵敏度和特异性，及对照和用于确保适当检测性能的参比物质。应基于起始材料、生产工艺、所需终产品属性和临床前研究制定DP质量标准，建议在DP稳定性研究中加入效力测定项，如使用替代效力检测，应提供替代效力结果与GE功能结果之间相关性的数据。

3、临床前研究的考虑

选择的体内研究动物种属和/或模型应证明对试验性基因组编辑产品或种属特异性替代产品的生物学反应。试验性基因组编辑产品的体内临床前安全性研究应尽可能纳入计划中的临床试验要素（如剂量范围、ROA、给药装置、给药计划、评价终点）。研究设计应足够全面，可以识别、表征和量化潜在的局部和全身毒性、发作（即急性或延迟）和潜在的缓解，以及剂量水平对这些发现的影响。

由于动物和人之间基因组序列不同，POC和/或安全性研究不能提供试验性人类基因组编辑产品信息时，可使用替代基因组编辑产品（例如，替代人类元素，包括基因组编辑组件、启动子、以及基因组编辑产品中种属特异性元素的转基因）。应提供使用替代基因组编辑产品的科学理由，并建立替代产品与试验性人类基因组编辑产品的生物学相关性。

使用包括无偏全基因组分析在内的多重正交方法（例如，计算机、生化、细胞分析方法）识别潜在脱靶位点。应使用多个供体的目标人体细胞类型进行分析。

4、临床研究的考虑

临床试验设计包括患者选择、有效和安全的产品给药方法（包括基于数据的配量、给药方案和治疗计划）、充分的安全监测和适当的终点选择。建议对接受人类基因组编辑产品的临床试验受试者进行长期随访，评估临床安全性。

研究人群：人类基因组编辑产品可能有重大风险，和不确定的潜在获益。此类产品的首次人体试验通常为没有其它或可接受的治疗方案的受试者。患有严重或晚期疾病的受试者可能更愿意接受试验性人类基因组编辑产品的风险。而这些受试者可能经历更多AE或正在接受伴随治疗，使安全性和有效性数据难以解释。因此，某些情况下，疾病进展较轻或较中度的受试者可能适合纳入首次人体临床研究。

剂量及给药方案：递送和拟定的给药方案应得到全面的临床前数据支持，可根据类似产品的临床经验指导，包括基因组编辑或未编辑的细胞或基因治疗产品。

治疗计划：建议通过受试者交错入组，规定连续受试者产品给药队列内和队列间的时间间隔，减缓与基因组编辑产品相关的预期风险。交错间隔应足以监测急性和亚急性AEs，在以相同剂量治疗其它受试者之前，或在随后治疗的受试者增加剂量之前。交错间隔还应考虑人类基因组编辑产品预期活性的持续时间。

监测与随访：对脱靶编辑充分监测，对靶位和脱靶编辑非预期结果的充分评估。基因组编辑产品给药时，对靶点和非靶点编辑的预期和非预期的长期影响尚不了解，建议产品给药后进行至少15年的长期随访。

涉及儿童研究的特殊考虑：对于涉及儿童的临床研究，相关风险大于最低风险，机构审查委员会须审核，通过预期的儿童临床获益说明这些风险的合理性。直接获益的预期应基于证据（例如，来自成年人或适当的动物模型）。建议首先设立成人受试者初始队列，获得安全性和可行性、生物活性和初步疗效的数据，支持儿科受试者入组的合理性。根据特定疾病，在入组更小的儿童和婴儿之前入组青少年。