心血管疾病是2型糖尿病患者的主要死因。糖尿病导致斑块更加容易破裂，并导致临床事件的发生率和严重性增加。钠-葡萄糖协同转运体2抑制剂(SGLT2i)是一类新近发现的抗糖尿病药物，作用于近端肾小管以减少葡萄糖重吸收，促进葡萄糖通过泌尿系统排出。在糖尿病患者中，SGLT2i的降血糖作用不依赖于胰岛素的分泌。据报道，SGLT2i除了对血糖有影响外，对糖尿病患者还有其他有益的作用。由于这些药物主要针对近端肾小管，许多文献描述了SGLT2i的肾脏保护作用。此外，研究证实，使用SGLT2i治疗可以减轻体重，降低心血管疾病(包括心力衰竭和高血压)的风险，并改善胰岛素抵抗、血脂状况和内脏肥胖。已有报道在体外培养的小鼠血管组织和内皮细胞中有SGLT2 mRNA和蛋白的表达，此外，内皮SGLT2蛋白上调通过减少sirtuin途径促进动脉粥样硬化的进展，并通过上调促炎细胞因子等炎症分子的表达来促进炎症过程。最后，在动物模型中，内皮SGLT2蛋白上调通过降低TIMP-1/MMP-2的比例表达降低了动脉粥样硬化斑块的稳定性。体外研究表明，高糖上调内皮细胞SGLT2的表达，SGLT-2I抑制动物模型动脉粥样硬化的发生发展。然而，内皮细胞SGLT2表达的基本病理基础以及SGLT2i在2型糖尿病患者动脉粥样硬化斑块发展中的作用尚未完全阐明。我们的目的是评估了钠-葡萄糖共转运体2 (SGLT2)表达和SGLT2抑制剂(SGLT2i)治疗对无症状糖尿病和非糖尿病患者颈动脉斑块的影响。

方法：我们选择了296例非糖尿病患者(非糖尿病组)和糖尿病合并无症状颈动脉狭窄患者(根据北美症状性颈动脉内膜切除术试验分类)，招募了8例因颅外高度(>70%)颈内动脉狭窄而接受颈动脉内膜切除术的患者。无症状患者接受了基线的临床检查和病史，且从未出现神经症状或脑部病变。所有患者均接受CT或MRI检查。糖尿病患者在研究开始前回答了一份关于糖尿病治疗药物的特定问卷，包括治疗开始和结束的日期、给药途径和使用时间，研究期间的药品库存信息和这份特定的问卷被用来对受试者进行分类。从未使用过SGLT2i的糖尿病患者被归类为“从未使用SGLT2i者”，已使用SGLT2i者被归类为“现已使用SGLT2i者”，现已使用SGLT2i者定义为至少使用SGLT2i6个月。接受SGLT2i治疗少于6个月的患者被排除在这项研究之外，目前所有使用者都可以获得有关治疗时间的信息。有心力衰竭、既往中风、瓣膜缺损、恶性肿瘤或高血压继发原因的患者纳入排除标准。颈动脉超声检查在单一超声仪(Aloka 5500)上进行。其中97例2型糖尿病患者在内膜切除术前使用SGLT2抑制剂治疗16±4个月。倾向评分匹配分析后，2型糖尿病患者分为未治疗组(n= 87)和治疗组(n= 87)。为了研究SGLT2表达水平对主要不良终点(MACE=卒中、短暂性缺血发作、心肌梗死和死亡)的影响，我们对MACE随访2年评估预后。

结果：与非糖尿病患者的斑块相比，糖尿病患者的斑块具有更高的SGLT2表达、炎症和氧化应激，SIRT6表达和胶原蛋白含量降低。与糖尿病患者的斑块相比，经SGLT2i治疗的2型糖尿病患者SIRT6表达和胶原含量增加，炎症、离子和氧化应激降低，从而显示出更稳定的斑块表型。这些结果支持体外对人主动脉内皮细胞(TeloHAEC-cells)的观察。事实上，与仅用高糖处理的细胞相比，在SGLT2i (100 nM canagliflozin)存在的高糖(25 mM)处理的EC表现出更高的SIRT6表达和降低的mRNA和蛋白SGLT2水平、核因子-kappa B (NF-ĸB)和基质金属肽酶9 (MMP-9)表达。动脉内膜切除术后2年，多变量Cox回归分析显示无糖尿病患者MACE的2年总生存率显著高于无糖尿病患者(P<0.01)。在糖尿病患者中，目前使用SGLT2i的患者在2年期间的MACE发生率显著低于从不使用SGLT2i的患者(P<0.05)。

图1 SIRT6和SGLT2在动脉粥样硬化斑块中的表达；(A)SIRT6和SGLT2表达水平(红色)在非糖尿病、SGLT2i使用者和从不使用SGLTi的非糖尿病患者的离烷化动脉粥样硬化斑块中的典型共聚焦激光扫描显微镜图像。血管性假血友病因子(von Willebrand factor，VWF，绿色)用于内皮细胞的免疫荧光信号定位，DAPI染色用于细胞核反染(蓝色)。Scale Bar=5μm。(B)ImageJ软件执行SIRT6和SGLT2的任意荧光单位。**p<0.01与非糖尿病患者的斑块样本相比，#p<0.05从不使用SGLT2i。(C)SIRT6(D)SGLT2和(E)NF-ĸB在糖尿病、非糖尿病和糖尿病SGLT2I使用者斑块中的蛋白表达水平为8，(F)以β-肌动蛋白和α-微管蛋白为内对照进行蛋白定量。应用细胞信号转导技术检测SGLT2蛋白表达。条带1=蛋白质阶梯分子量标记，条带2=非糖尿病，条带3=从不SGLT2i-使用者，条带4=SGLT2i-使用者。密度分析用ImageJ软件计算并表示为**p<0.01的任意单位(AU)，与不使用SGLT2i的患者相比，#p<0.05。

图2.动脉粥样硬化斑块类型；(A)硝基酪氨酸(X40)、肿瘤坏死因子-α(X40)、胶原含量(X40)、巨噬细胞(CD68)(X40)和基质金属肽酶9(X40)(X40)的免疫化学，以及非糖尿病、目前使用钠-葡萄糖共转运体-2抑制剂(SGLT2i)的患者，而从不使用SGLT2i的患者的无症状斑块的免疫化学。图中显示了类似的斑块区域。这些结果是典型的对照，当前的SGLT2i使用者，而不是SGLT2i使用者的无症状斑块。(B)在当前使用sglt2i和从未使用sglt2i的无症状斑块中硝基酪氨酸、TNF-α、胶原蛋白含量、CD68和MMP-9(方框图显示了中位数、第25和第75个百分位数、范围和极值)。*与非糖尿病患者的斑块相比，P<0.05。§与当前使用SGLT2i有1个斑块相比，P<0.05。

图3 根据糖尿病状态(A)、SGLT2i治疗(B)和SGLT2颈动脉粥样硬化斑块含量(C)进行MACE Cox回归分析(根据年龄、性别、BMI、血压、心率、胆固醇、HDL胆固醇、LDL胆固醇、甘油三酯水平、心脏病、高血压、血脂异常、当前吸烟、β-受体阻滞剂、ACE抑制剂、钙抑制剂、噻嗪利尿剂和阿司匹林)进行生存分析(调整了年龄、性别、BMI、血压、心率、胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯水平、心脏病、高血压、血脂异常、当前吸烟、β-受体阻滞剂、ACE抑制剂、钙抑制剂、噻嗪利尿剂和阿司匹林)

结论：这些发现揭示了SGLT2/SIRT6通路在糖尿病动脉粥样硬化病变炎症过程中的重要作用，并提示SGLT2i可能对其有有利的调节作用。

原文出处：

D'Onofrio N,  Sardu C,  Trotta MC,et al.Sodium-glucose co-transporter2 expression and inflammatory activity in diabetic atherosclerotic plaques: effects of sodium-glucose co-transporter2 inhibitor treatment.Mol Metab 2021 Sep 06.